Caracterização de isolados fúngicos ectomicorrízicos na promoção do crescimento e na colonização radiculat de Eucalyptus dunnii Maiden

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-Graduação em BioctecnologiaInúmeros estudos já foram desenvolvidos para selecionar fungos ectomicorrízicos (fECM) eficientes para inoculação de plantas de interesse silvicultural. A maioria deles analisou o efeito da inoculação individual dos fungos sobre o crescimento das plantas. Embora importantes para o desenvolvimento de inoculantes e técnicas de inoculação, estes não reproduzem fielmente as condições naturais. Sabe-se que a ocorrência simultânea de vários fECM na mesma planta pode contribuir para maiores benefícios através de diferentes mecanismos. Assim, o objetivo deste trabalho foi o de testar o efeito da inoculação de diferentes fECM, individualmente ou em combinações, na absorção de fósforo e promoção do crescimento de mudas de Eucalyptus dunnii. Para isso, foram conduzidos estudos envolvendo os seguintes aspectos: efeito da inoculação de isolados de fECM, aplicados individualmente e em mistura, no crescimento de E. dunnii sob condições de casa de vegetação; caracterização anatômica e morfológica (morfotipagem) das micorrizas formadas axenicamente por cada isolado nas raízes dessa planta; e seqüenciamento da região ITS do gene rRNA do isolado de Chondrogaster angustisporus, UFSC-Ch163. Em casa de vegetação, utilizando-se substrato esterilizado, verificou-se que a inoculação das plantas com maior número de isolados de fECM promoveu maior absorção de P e maior crescimento do que o tratamento sem inoculação e aqueles envolvendo apenas um isolado, notando-se maior eficiência nas combinações que envolviam o isolado UFSC-Pt188, Pisolithus microcarpus. A inoculação individual das mudas com o isolado UFSC-Pt132 não teve efeito sobre as variáveis analisadas. Na síntese micorrízica in vitro, apenas três isolados formaram micorrizas: UFSC-Pt132, UFSC-Ch163 e UFSC-Pt188. O isolado SA9 (Scleroderma flavidum) não formou micorrizas detectáveis. As micorrizas dos isolados UFSC-Pt132 e UFSC-Pt188, da espécie Pisolithus microcarpus, apresentaram as mesmas características morfológicas e anatômicas, não sendo possível a distinção entre eles através da morfotipagem. As micorrizas formadas pelo isolado UFSC-Ch163 (Chondrogaster angustisporus), porém, foram bastante distintas. Quando a seqüência da região ITS do gene rRNA de C. angustisporus UFSC-Ch163 foi analisada em conjunto com as dez mais similares obtidas no NCBI Genbank, esse isolado formou um agrupamento separado com um fECM não identificado e não cultivado, oriundo do arquipélago das Seychelles. A porcentagem de similaridade entre a seqüência de C. angustisporus e as dos dez fungos ectomicorrízicos mais similares, disponíveis no NCBI, variou de 82 a 100 %, demonstrando uma afinidade significativa com espécies dos gêneros Gloeocantharellus, Ramaria, Gautieria, Gomphus, Hysterangium e Sphaerobolus, reforçando a recente proposta que classifica o gênero Chondrogaster na subclasse Phallomycetidae, formada pelo agrupamento das ordens Gomphales e Phallales, com base nas seqüências dos genes nuc-LSU-rRNA e mt-SSU-rRNA e de proteínas

New isolates of ectomycorrhizal fungi and the growth of eucalypt

O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência de isolados fúngicos ectomicorrízicos na colonização radicular, na absorção de fósforo e no crescimento de mudas de Eucalyptus dunnii. Os inóculos de dez isolados de Chondrogaster angustisporus, Hysterangium gardneri, Pisolithus spp. e Scleroderma spp. foram produzidos em uma mistura turfa-vermiculita suplementada com meio de cultura líquido. As plantas foram cultivadas em substrato semelhante com macro e micronutrientes. Os tratamentos foram distribuídos em casa de vegetação em delineamento inteiramente casualizado. Após três meses, as plântulas com inoculação dos isolados – UFSC-Sc68 (Scleroderma sp.), UFSC-Ch163 (Chondrogaster angustisporus) e UFSC-Pt188 (Pisolithus microcarpus) – tiveram os maiores valores de matéria seca e de fósforo na parte aérea. Esses valores foram superiores ou equivalentes aos observados nas plantas sem inoculação, adubadas com 16 vezes mais fósforo. Esses isolados foram selecionados para futuros estudos, a fim de se estabelecerem técnicas de produção de inoculantes, para serem usados em programas de reflorestamento em condições de viveiros e campo.The objective of this work was to evaluate the efficiency of ectomycorrhizal isolates on root colonization, phosphorus uptake and growth of Eucalyptus dunnii seedlings. Inocula of ten ectomycorrhizal isolates of Chondrogaster angustisporus, Hysterangium gardneri, Pisolithus spp., and Scleroderma spp. were aseptically produced in a peat-vermiculite mixture supplemented with liquid culture medium. Plants grew in a similar substrate supplemented with macro- and micro-nutrients; treatments were randomly distributed in a greenhouse. After three months, seedlings inoculated with three isolates – UFSC-Sc68 (Scleroderma sp.), UFSC-Ch163 (Chondrogaster angustisporus), and UFSC-Pt188 (Pisolithus microcarpus) – had a phosphorus shoot content and a shoot dry matter higher or equivalent to those of noninoculated controls which had been fertilized with a 16-fold phosphorus amount. These isolates were selected for new studies for establishing inoculum production techniques, in order to be applied in reforestation programmes under nursery and field conditions

New isolates of ectomycorrhizal fungi and the growth of eucalypt Novos isolados de fungos ectomicorrízicos e o crescimento de eucalipto

The objective of this work was to evaluate the efficiency of ectomycorrhizal isolates on root colonization, phosphorus uptake and growth of Eucalyptus dunnii seedlings. Inocula of ten ectomycorrhizal isolates of Chondrogaster angustisporus, Hysterangium gardneri, Pisolithus spp., and Scleroderma spp. were aseptically produced in a peat-vermiculite mixture supplemented with liquid culture medium. Plants grew in a similar substrate supplemented with macro-and micro-nutrients; treatments were randomly distributed in a greenhouse. After three months, seedlings inoculated with three isolates - UFSC-Sc68 (Scleroderma sp.), UFSC-Ch163 (Chondrogaster angustisporus), and UFSC-Pt188 (Pisolithus microcarpus) - had a phosphorus shoot content and a shoot dry matter higher or equivalent to those of noninoculated controls which had been fertilized with a 16-fold phosphorus amount. These isolates were selected for new studies for establishing inoculum production techniques, in order to be applied in reforestation programmes under nursery and field conditions.<br>O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência de isolados fúngicos ectomicorrízicos na colonização radicular, na absorção de fósforo e no crescimento de mudas de Eucalyptus dunnii. Os inóculos de dez isolados de Chondrogaster angustisporus, Hysterangium gardneri, Pisolithus spp. e Scleroderma spp. foram produzidos em uma mistura turfa-vermiculita suplementada com meio de cultura líquido. As plantas foram cultivadas em substrato semelhante com macro e micronutrientes. Os tratamentos foram distribuídos em casa de vegetação em delineamento inteiramente casualizado. Após três meses, as plântulas com inoculação dos isolados - UFSC-Sc68 (Scleroderma sp.), UFSC-Ch163 (Chondrogaster angustisporus) e UFSC-Pt188 (Pisolithus microcarpus) - tiveram os maiores valores de matéria seca e de fósforo na parte aérea. Esses valores foram superiores ou equivalentes aos observados nas plantas sem inoculação, adubadas com 16 vezes mais fósforo. Esses isolados foram selecionados para futuros estudos, a fim de se estabelecerem técnicas de produção de inoculantes, para serem usados em programas de reflorestamento em condições de viveiros e campo